
生理盐水凝聚法 ①载玻片法:操作简便,适合大批量样本检测,但反应周期较长;若待测血清中的抗体滴度较低,则难以引发红细胞凝聚现象,因此,不适合反向分型检测。 ②试管法:由于离心效应可以加速凝聚反应,故反应时间较短,同时借助离心力能使红细胞更加紧密接触,从而促进凝聚效果,适用于急症检测。 红细胞亚型的抗原性较弱,当抗A抗B标准血清的效价较低时,容易导致漏检或误判。若添加O型(抗A、B)血清并结合反向分型,可有效防止这类误差。 载玻片法凝聚结果判定:红细胞呈现均匀分布状态,无凝聚颗粒显现,显微镜下红细胞分散。 在低倍显微镜下凝聚程度强弱判断标准: ①呈现一片或多片凝聚块,仅存少量独立游离红细胞为(++++)。 ②呈现多个大颗粒状凝聚块,伴有少量独立游离红细胞为(+++)。 ③存在数个小凝聚颗粒和部分细微凝聚颗粒,游离红细胞占比约一半为(++)。 ④肉眼可见无数细沙状小凝聚颗粒,在显微镜下观察,每个凝聚团包含5~8个以上红细胞凝聚为(+)。 ⑤可见数个红细胞凝聚成团,周围遍布大量游离红细胞(±)。 ⑥可见极少数红细胞凝聚,而多数红细胞依旧分散分布为混合凝聚外观。 ⑦显微镜下未见细胞凝聚,红细胞均匀分布为(-)。 凝胶微柱法 属于一种免疫学技术,通过红细胞抗原与对应抗体在凝胶微柱介质中发生的凝聚反应实现检测目的。血型抗体采用单克隆抗体形式,加入试剂和样本后,利用专用离心机离心处理即可直接以肉眼观察结果或由血型分析仪解析数据。此方法操作规范,定量加样,确保结果精确性。 抗A、抗B和抗AB标准血清标准 标准血清均采集自健康个体,并需满足以下条件:①特异性:仅与对应的红细胞抗原发生凝聚反应,无非特异性凝聚。②效价:我国标准抗A和抗B血清效价均不低于1:128。③亲和力:我国标准要求抗A对A1、A2及A2B发生反应开始出现凝聚的时间分别为15秒、30秒和45秒;抗B对B型红细胞开始出现凝聚的时间为15秒。凝聚强度达到3分钟时,凝聚块面积不小于1平方毫米。④冷凝集素效价:不超过1:4。⑤无菌。⑥补体灭活。
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